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毕业论文引言

2017-09-05 15:05 本文地址:http://www.qwqk.net/news5817.html 人气:849

    以下是权威期刊组织为大家查阅资料并整理的毕业论文引言的范文,欢迎各位阅读借鉴。


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    1  引言
    核苷酸及其衍生物在食品、医学、农业、化妆品、及生化试剂等领域具有十分广泛的用途。尤其在我国核苷酸的需求量很大,但主要依靠进口,在这个方面缺口很大[1]。目前核苷酸的生产工艺不完善,利用酶解法生产核苷酸以及酶解工艺条件的研究,在国内报道的很少,国内吴莉莉等人曾利用双酶法降解核酸,生产呈味核苷酸i+g[2]。杨斌等人也对利用酶解法生产呈味核苷酸的生产进行过论述,但是都未曾对酶解核酸的工艺条件进行过优化摸索工作。
    目前,对于核苷酸三种主要生产方法相比较而言,酶解法成本低,同时可以生产四种产品,明显优于其他两种生产方法。对于酶解法利用的原料rna,可以从啤酒废酵母中提取,解决了啤酒厂废酵母的出路,做到了资源的再生和利用。再对提取rna的废酵母考虑综合利用,可以产生更大的经济效益和社会效益。虽然酶解法生产四种核苷酸有很大的优越性,但是,该方法中存在着以下几个主要问题:
    1、原料质量差。目前国内rna的纯度在80%左右,溶解后存在大量的杂蛋白,降低了酶解率。并且由于杂蛋白的存在增加了分离的难度。
    2、生产的菌株水平低:利用桔青霉作为生产核酸酶p1的菌株,其生产的酶活仅为国外菌株的60%,对rna的酶解率仅为70-85%,国外酶解率可以达到85%-95%。
    3、离交分离收率低:一方面由于酶解不彻底,存在许多杂质如寡聚核苷酸等,增加了分离难度;另一方面由于分离材料的选择性差,对核苷酸的吸附容量小,不能高效的分离四种核苷酸。
    4、结晶技术不过关。
    所以通过rna水解实验的研究,对rna水解条件进一步优化,得出水解rna的最佳工艺,尽可能多的得到单核苷酸,应用在各个领域。
    1.1  核糖核酸酶
    1.1.1  概述 
    从20世纪60年代以来,核糖核酸酶作为一种模型蛋白被普遍用于分子生物学研究。核糖核酸酶(rnase)的全名为聚核苷-α-寡核苷酸转移酶,是一类广泛存在于动植物体内的水解核酸链中磷酸二酯键的酶。这些酶对核酸的作用是水解核苷酸残基之间的磷酸二酯键,生成寡聚核苷酸或单核苷酸。rnase的主要生理功能是控制细胞内rna的种类与数量分布,除参与核糖核酸转录后的剪切、修饰和降解等过程外,还与某些植物的自交不亲和性、器官发生、宿主的防御机制、控制肿瘤血管生成、杀灭肿瘤细胞及抑制病毒复制等有关。
    1.1.2  核糖核酸酶的分类
    根据酶作用核酸分子部位的不同,可分为3’-磷酸二酯酶和5’-磷酸二酯酶。根据反应的最适ph不同分为酸性核糖核酸酶和碱性核糖核酸酶。酸性核糖核酸酶主要存在于细胞的溶酶体中,水解所吞噬的异物中的rna;碱性核糖核酸酶存在于胞液中,水解胞液中的rna。根据降解rna底物的不同一般分为3类:rnaseⅰ既能催化rna 水解,又可催化dna水解,产生5’-单核低聚核糖核苷酸或5’-单核低聚脱氧核糖核苷酸;rnaseⅱ仅使rna释放2’、3’环状嘌呤核糖核苷酸和3’-嘌呤核糖核苷酸;rnaseⅲ只水解rna释放2’、3’环状嘌呤或嘧啶核糖核苷酸和3’-嘌呤或嘧啶核糖核苷酸。根据酶作用的专一性可分为核酸外切酶①蛇毒磷酸二酯酶:从毒蛇的毒液中提取的,它从核酸的单链的3’-oh端开始水解,生成5’-单核苷酸,该酶的最适ph为9,ca2+和mg2+为激活剂,还原剂和螯合剂抑制酶活力;②脾磷酸二酯酶:从牛脾中提取的,水解产物为3’-单核苷酸。核酸内切酶:核酸酶s1从米曲霉菌中提取出来的单链专一性内切酶,产生5’-单核苷酸,最适ph为4.5-5.0,需要zn2+、co2+也可刺激酶活力,但mg2+、ca2+、cu2+无效。该酶对热较稳定,底物存在时于65℃保温不失活。内切兼外切酶:核酸酶p1从桔青霉制得的,故又称桔青5’-磷酸二酯酶,纯化的p1酶对单链专一;最适温度70℃,最适ph5;zn2+为激活剂。8mol/l的尿素和5mol/l的盐酸胍可抑制酶的活性。核酸酶p1酶还具有3’-磷酸单酯酶的活性,可水解3’-单核苷酸、核苷二磷酸、和3’-二核苷酸的3’磷酸键,核酸酶p1酶常常用于制备5’-单核苷酸。

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